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链替换扩展辅助CRISPR-Cas12a病毒核酸比色分析策略

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  • 发布时间: 2023-12-14

 病毒感染的准确、快速的诊断对控制病毒的传播和评估疾病的进展至关重要。通常,血清学检测和核酸分析可用于病毒感染的诊断。病毒的抗原或相应的抗体主要是血清学检测的目标。由于血清学试验的结果容易受到抗原浓度和状态的影响,患者通常需要几天到几周才能产生可检测的抗体,这可能会延迟病毒检测。相比之下,核酸分析可以为确定病毒感染提供高度敏感和准确的结果。核酸分析的金标准方法是聚合酶链反应(PCR),它需要昂贵的专业设备和经验丰富的人员,这限制了它的现场应用。

 

  比色法具有操作简单、直观等优点,广泛应用于生物传感中。然而,这些策略的实际应用总是受到低检测灵敏度的限制。收集规则间隔短回文重复序列(CRISPR)和CRISPR相关(Cas)该系统最初起源于细菌和古代细菌,并被探索用于分子诊断。CRISPR-Cas12a系统可以可以放大信号CRISPR-Cas12a视觉和敏感分子诊断预计将采用介导比色法。

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通过结合SDA和CRISPR-Cas12a对HBVDNA设计了比色分析SDACC策略。SDA和CRISPR-Cas12a共同实现信号放大和转换,最终导致肉眼可以直接观察到的颜色变化。SDACC该策略可以敏感地检测目标HBVDNA,LOD为41.8fM,检测目标DNA单个碱基在序列中的错配表现出极好的特异性。SDACC作为一种具有巨大潜力的现场核酸分析方法,预计将应用于资源有限的领域。

 

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