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行业动态

CRISPR-Cas核酸酶介导的植物基因组编辑脱靶效应点评及解决对策

  • 作者:admin
  • 发布时间:2020-09-28 15:05
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CRISPR-Cas9、CRISPR-Cpf1(Cas12a)等核酸酶因为能够对于特殊基因组DNA序列完成可编程控制器定项剪切,能够以史无前例的精确度和方便快捷度开展基因组编辑,被广泛运用于动、绿色植物及微生物菌种的基因功能分析、新种源研制、基因疗法等基础研究及运用实践活动工作上,被觉得是二十一世纪生物科技行业的重大进展。
CRISPR-Cas基因组编辑系统软件由Cas核酸酶蛋白质和指导RNA两一部分构成,在其中指导RNA与基因组总体目标结构域DNA序列相辅相成匹配,并正确引导Cas核酸酶蛋白质对基因组DNA发夹结构开展定项剪切。
但研究发现,指导RNA正确引导的Cas核酸酶定项剪切活性事实上存有一定水平的容错机制几率,即Cas核酸酶在总体目标结构域编码序列类似的基因组地区存有潜在性的特异剪切活性,也就是一般 常说的“脱靶”。这类来源于CRISPR-Cas特异剪切活性造成的脱靶会对编辑目标造成不确定性的分子生物学效用,比较严重危害根据CRISPR-Cas核酸酶的基因组编辑技术性在基础研究、运用实践活动中的实效性及可信性。
17年,发表在Nature Methods 的“Unexpected mutations after CRISPR-Cas9 editing in vivo”的通信文章内容,报导了CRISPR-Cas9编辑小白鼠基因组中超出1500个单多肽链突然变化及上一百多个大面积段缺少、插进结构域,觉得CRISPR-Cas9基因组编辑技术性能够诱发造成很多脱靶基因变异 [5]。该科学研究結果的公布,立刻引起了学术界及群众对CRISPR-Cas9基因组编辑技术性在基础研究中可信性、实践活动运用中安全系数的猛烈探讨及普遍关心。
 
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