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行业动态

生物学家进行CRISPR-Cas13a介导的精准指定RNA编辑的人工机器

  • 作者:admin
  • 发布时间:2020-08-19 14:45
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精准指定RNA编辑的人工机器,李轩研究组与研究者杨晟、中国科学院上海巴斯德研究室研究者郝沛及美国密歇根大学专家教授王红兵协作,对探索与发现CRISPR大家族中具备融合特异性编码序列单链RNA能力的Cas13a,最先在模式生物裂殖酵母(S pombe)中完成了其靶点内源性RNA和溶解靶点RNA的作用。进一步,设计方案利用Cas13a的更新改造物质dCas13a(缺失RNA激光切割特异性的突然变化),将dCas13a和人源的RNA腺嘌呤脱氨酶催化反应结构域(hADAR2d)结合,引进到裂殖酵母中;再根据设计方案RNA编辑机器的靶点“零件”具体指导RNA,完成了对内源性RNA的精准指定编辑。以便对RNA指定编辑机器的设计方案和主要参数(编辑碱基部位、间距、具体指导RNA构造和长短等)开展提升,科学研究工作人员搭建了一系列不一样的设计方案,并利用一个双莹光汇报(reporter)系统软件来检测不一样设定的编辑高效率,进而得到 了精确RNA编辑机器的最佳主要参数。提升后的编辑机器对内源性靶点RNA的编辑高效率做到了59%。最终,该科学研究完成的精确RNA编辑机器的作用,进一步反映在对裂殖酵母反转录转座子Tf1突然变化株的修补和实际操作的试验中。Tf1与动物细胞的逆转录病毒相近,其弹跳和增加必须历经化工中间体RNA的逆转录流程。科学研究工作人员利用精确RNA编辑,修复了Tf1突然变化株的转座能力,这一运用对逆转录病毒干涉和实际操作出示了一个有发展潜力的专用工具。
 
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