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行业动态

从 gRNA 设计方案到挑单克隆全程具体指导

  • 作者:admin
  • 发布时间:2020-08-10 11:27
  • 点击:
CRISPR-Cas9 是一种病菌获得性免疫,用以溶解侵入的外源性 DNA。CRISPR RNA (crRNA) 与基因表达激话 crRNA (Trans-activating crRNA, tracrRNA) 淬火产生的一氧化氮合酶能非特异鉴别两者之间相辅相成的基因组序列,正确引导 Cas9 核苷酸内切酶在目地精彩片段转化成 DNA 双解链。
根据基因工程技术方式对 crRNA 和 tracrRNA 开展更新改造,将其联接在一起获得 sgRNA (single guide RNA)。根据将表达 sgRNA 的原件与表达 Cas9 的原件相互连接,获得能够 另外表达二者的质粒,将其转染体细胞,便可以对目的基因开展遗传基因实际操作,在 PAM (5'-NGG) 上下游~3bp 开展激光切割。
 
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