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行业动态

由 RNA 引导的 Cas9 靶向 DNA

  • 作者:admin
  • 发布时间:2020-08-07 12:47
  • 点击:
 
Cas9 是一个 DNA 约束性内切酶,可以在与引导 RNA 互补的 DNA 上造成双链创口 (DSBs)。理所应当,Cas9 蛋白的作用也在于引导 RNA。
而引导 RNA 由 crRNA 和 tra crRNA 两一部分构成, crRNA 的 5』尾端与总体目标 DNA 互补,而在 3』尾端与 tra crRNA 产生双链推动 Cas9 蛋白的募资。由于 DNA 靶向功效是由 DNA-RNA 中间匹配来进行的,更改 RNA 的序列就可以轻轻松松更改系统软件的靶向非特异 (图 B)。
高效率的靶向功效还必须总体目标 DNA 序列近侧存有一个短结构域,被称作是前间区序列相邻基序 (PAM),根据非特异挑选 PAM 构造周边的序列,CRISPR-Cas9 人体免疫系统就可以区别出什么是本身的序列,什么并不是。
DNA 序列上存有 PAM 构造便会被裁切,而 CRISPR 本身基因座上的序列,一样也可以被引导 RNA 鉴别并融合,但由于不会有 PAM 构造,因此 不容易被 Cas9 蛋白激光切割。
 
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