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行业动态
PCR关键技术进度
- 作者:admin
- 发布时间:2020-08-04 11:50
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二种独特的引物和缓冲溶液.引物I3'尾端与靶编码序列相辅相成,5'端含T7RNA多聚酶的启动子,这一引物是用以合成cDNA的.引物Ⅱ的碱基序列与cDNA的5'未端相辅相成.
在NASBA反映时,最先引物Ⅰ与RNA模板复性(融合),AMV逆转录酶催化反应合成cDNA,RNaseH水解反应cDNA上的RNA,产生一条多肽链的DNA;引物Ⅱ随后与此cDNA的5'未端融合,逆转录酶在这里DNA模板的具体指导下合成第二条DNA链.那样产生的DNA发夹结构带有T7RNA多聚酶的启动子.该酶即为此DNA为模板,基因表达出与试品RNA编码序列同样的RNA链,并且每条DNA模板在该水解作用下可合成约一百个复制的RNA.每条新的RNA又可做为逆录酶的模板合成cDNA.这般不断开展,将得到 大量的RNA和cDNA.