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行业动态

转录依靠的扩增系统

  • 作者:admin
  • 发布时间:2020-08-04 11:44
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转录依靠的扩增系统(Transcript-based amplification system,TAS),是Kwen等于1989年科学研究报导的,关键用以扩增RNA生成A、B引物,引物A的3'尾端与待扩增RNA相辅相成,其5'端有T7RNA多聚酶的启动子信息内容.逆转录酶以A引物为起始点生成cDNA;引物B与其cDNA3'端相辅相成生成cDNA第二链.逆转录酶除具备逆转录特异性外,也有DNA多聚酶的活性及RNaseH的特异性.T7RNA多聚酶又为此双链DNA为模板.转录出与待扩增RNA一样的RNA,这种RNA又可做为下轮反映的模板.T7RNA多聚酶的催化反应高效率很高,一个模板可转录10~103个RNA复制,因此反映液中待检RNA的总数以10的指数值方法扩增.
TAS的主要特点是扩增高效率,由于其RNA拷贝数呈10的指数值方法提升,只需6个循环系统靶编码序列的拷贝数就能做到2×106.它的另一个特性是非特异高,因为TAS只有开展6次溫度循环系统,错掺率低,加上用葡聚糖珠夹心巧克力混种,因此非特异也高.尽管此方法有较高的非特异和敏感度,但其循环系统全过程繁杂,需反复添加逆转录酶和T7RNA多聚酶,尚需进一步科学研究.
 
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