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行业动态

Cas9 Endonuclease Dead

  • 作者:admin
  • 发布时间:2020-04-22 12:04
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Cas9 Endonuclease Dead
cas9

 

Cas9 Endonuclease Dead,也称为死亡Cas9dCas9,是Cas9的突变形式,其内切核酸酶活性通过其内切核酸酶结构域中的点突变被去除。类似于它的未突变形式中,dCas9在CRISPR系统中使用连同gRNAs靶向特定基因或核苷酸的互补gRNA与PAM的序列,其允许Cas9结合。

Cas9通常具有2个称为RuvC和HNH结构域的内切核酸酶结构域。点突变D10A和H840A改变2个重要残基对于内切核酸酶活性,最终导致其失活。尽管dCas9缺乏内切核酸酶活性,但它仍然能够结合其指导RNA和被靶向的DNA链,因为这种结合由其他结构域控制。

如果gRNA以阻止转录因子和RNA聚合酶进入DNA的方式定位dCas9,那么单独这一点通常足以减弱直接阻断靶基因的转录。然而,这种结合DNA的能力也可用于激活,因为dCas9具有可修饰的区域,通常是蛋白质的NC末端,可用于连接转录激活因子。

 

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