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行业动态

T7 RNA的各项数据

  • 作者:admin
  • 发布时间:2020-04-22 12:01
  • 点击:

T7 RNA的各项数据
t7rna

 

一、来源:由大肠杆菌表达,表达基因为嗜菌体T7 RNA Polymerase基因。

    活性定义: 37℃60分钟内,催化1 nmol AMP掺入到多聚核苷酸中所需的酶量定义为1个活性单位。

二、活性检测条件40mM Tris-HCl(pH8.0)6mM MgCl210mM DTT2mM spermidine0.5mM NTP0.6MBq/ml[3H]-ATP20μg/ml plasmid DNA containing the specific T7 RNA Polymerase promoter sequence

三、纯度:不含DNA内切酶和外切酶,不含RNA酶。

四、酶储存溶液:50mM Tris-HCl(pH8.0)150mM NaCl5mM DTT0.1mg/ml BSA0.5mM Elugent50% glycerol

五、Transcription Buffer(5X)200mM Tris-HCl(pH7.9 at 25℃)30mM MgCl250mM DTT50mM NaCl10mM spermidine

六、失活或抑制:70℃加热10分钟可使T7 RNA Polymerase失活。加入适量EDTA也可以使T7 RNA Polymerase失活。螯合剂、浓度大于150mM的钠、钾或铵盐可以显著抑制T7 RNA Polymerase的活性。

七、T7consensus promotersequence如下:

    -15  -10   -5   +1  +5

    TAATACGACTCACTATAGGGAGA

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