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行业动态

dCas9作为转录调节的工具

  • 作者:admin
  • 发布时间:2020-04-17 11:47
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dCas9作为转录调节的工具
dcas9

 

全世界的科学家都对CRISPR作为基因编辑器的非凡简洁性和多功能性感到惊叹 - “杀死”它的催化活性可能是一个更加精彩的想法!

2013年,齐等人。来自化脓性链球菌的突变Cas9的核酸酶结构域(在HNH结构域中产生H840A突变和在RuvC结构域中产生D10A突变)以产生核酸酶缺陷的“dCas9”(也称为dCas9无效突变体)。尽管Cas9的这种“迟钝”和“死亡”版本不再能够切割DNA,但在sgRNA的指导下,它仍能以相同的精度靶向和结合DNA。但是,不是不可逆地改变基因组,dCas9的结合干扰靶位点的转录 - 导致基因的可逆沉默。

使用dCas9本身作为转录干扰的方法只是一个开始。不久之后,研究人员还开始附加效应物(如阻遏蛋白和激活因子结构域),以利用dCas9的可逆基因激活,表观基因组编辑等目标定位能力。无论是启动子区域,调控区域还是编码区域,科学家们都可以使用CRISPR dCas9系统作为模块化支架,轻松实现附着,实现对任何基因的控制,而不会引入不可逆的DNA损伤突变。

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