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行业动态

双链断裂(DSB)之后,会有两种修补方法产生的可能

  • 作者:admin
  • 发布时间:2020-04-16 00:18
  • 点击:

双链断裂(DSB)之后,会有两种修补方法产生的可能
cas9

 

Non-Homologous End Joining (NHEJ)

Homology Directed Repair (HDR)

Cas9导致基因不被表述是由NHEJ修补通道引起的,NHEJ修补通道。

HDR vs. NHEJ

一、Ku70/Ku80鉴别DSB

二、DNA-PKcs XRCC4-ligase IV会被招募回来,一起还要来PAXX, XLF,产生1complex, 这一complex会把DSB修补好

这一过程会引起1-10个碱基的插进,由2/3的概率会引起frameshift 突变,造成基因没法被表述,也就是人们说的基因除。

殊不知,Cas9导致的DSB不一定会引起NHEJ,由于DSB end的碱基并没有毁坏,这类end也叫blunt end,非常容易再度黏连一起。那麼突变是如何引起的?

实际上,就算blunt end再度黏连一起,sgRNA会再度鉴别这些序列,随后Cas9会再度切,不断下来,直至产生了由NHEJ引导出的突变,sgRNA才不会鉴别这些序列。

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