cas12a的功能性

扩展Cas12a的全部功能

WeiLi等人发现，V-A型Cas12a系统是十分保守的，尤其在成熟的crRNA序列和二级结构中。基于这一可维护性，研究人员推测这些所需的PAM序列也是可维护的。本文体外研究表明，这些新鉴定的Cas12a核酸酶可以利用5T-PAM浓缩区，作者随之发现许多Cas12a核酸酶编辑哺乳动物基因组的潜在部位。

利用非常规的PAMs增加基因组的覆盖率

与广泛使用的AsCas12a和LbCas12a相比，这6种Cas12a的同源物质可以识别更简单的5-TTNPAM，将基因组的垄断率提高4倍。另外，在体外切割试验中，发现HkCas12a可以利用很规则的PAM(5-YYN和5-TBBN-)。细胞系中很少鉴定出PAM序列，但HkCas12a可以利用5’ytn和5’tynpams的鉴定来实现哺乳动物的基因编辑。在哺乳动物基因组中，与经典的5-TTNPAM相比，HkCas12a对PAM的识别可以将HkCas12a的靶向范围增加三倍。