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行业动态

Wei Li等人对cas12a的研究

  • 作者:admin
  • 发布时间:2020-02-25 17:04
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Wei Li等人cas12a的研究
cas12a

 

一、扩展Cas12a的全部功能

Wei Li等人发现, V-ACas12a系统是十分保守的,尤其在成熟的crRNA序列和二级结构中。基于这种保守性,研究人员推断他们必需的PAM序列也是保守的。本文的体外研究数据显示,这些新鉴定的cas12a核酸酶可以利用5T-PAM富集区,作者随后发现了更多用cas12a核酸酶编辑哺乳动物基因组的潜在位点。

二、利用非常规的PAMs增加基因组的覆盖率

与广泛使用的AsCas12aLbCas12a相比,这六种Cas12a的同源物中的一些可以识别更简单的5-TTN PAM,使得基因组的覆盖率提高到四倍水平。此外,在体外切割试验中,他们发现HkCas12a可以利用非常规聚丙烯酰胺(5-YYN5-TBBN-) 尽管在细胞系中很少有PAM序列被鉴定出来,但研究者可以利用HkCas12a5-YTN  5-TYYN PAMs 的识别来实现对哺乳动物的基因编辑。在哺乳动物基因组中,与经典的5-ttnpam相比,cas12aPAM的识别可以使cas12a的目标范围增加两倍。

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