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行业动态

基于CRISPR / Cas9系统的编码

  • 作者:admin
  • 发布时间:2020-02-18 11:00
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基于CRISPR / Cas9系统的编码

sgrna

基于CRISPR / Cas9系统的编码sgRNA和供体DNA 的线性化双链DNA的直接传递,用于生成单核苷酸变体

用于基因组编辑的CRISPR / Cas9需要提供指导RNA序列和供体DNA才能进行靶向的同源重组。通常,作为供体模板的单链寡聚脱氧核苷酸和编码指导RNA的质粒作为两个单独的组分递送。然而,在单核苷酸变体的多重产生中,这种两组分递送系统受到难以将匹配的sgRNA和供体DNA 对递送至靶细胞的限制。在这里,我们描述了一种新型的代码传递系统,称为“ sgR-DNA”,它使用由供体DNA成分和编码sgRNA的成分组成的线性化双链DNA。我们的基于sgR-DNA的方法易于实现,因为它不需要克隆步骤。这个递送系统在大肠杆菌和人类细胞中产生多重基因组替代的潜力。

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