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行业动态
Cas9的编码基因的靶向基因敲除
- 作者:admin
- 发布时间:2019-12-19 12:55
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最近几年基因编辑技术异常火爆,CRISPR/Cas9技术面世以后,弥补了传统基因编辑技术的诸多不足,使得基因的“任意编辑”变得越来越容易。也因此,CRISPR/Cas9技术当仁不让的成为基因编辑技术的“王牌”,大有一副取而代之的势头。
Cas9的编码基因的靶向基因敲除
细胞内基因组DNA通过CRISP特异性识别Cas9复合体(包括Cas9和sgRNA )后,Cas9内核酸酶特异性切断靶基因组DNA双链,产生DSB损伤,诱发DNA损伤修复机制。
其中NHEJ修复是一种容易出错的修复,在修复过程中随机引入或删除碱基对,引起目标基因内碱基对的删除或插入( indel ),形成编码变异,引起目标基因的突变,实现基因敲除。
另一方面,编码基因的靶外显子的5 '侧翼和3 '侧翼分别设计sgRNA的话,就可以实现删除靶基因内的片段基因的敲除。