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行业动态
Cas9：外源DNA俘获“黑名单”登记
- 作者：admin
- 发布时间：2019-12-19 12:46
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外源DNA俘获：“黑名单”登记
简易而言，CRISPR/Cas9系统在那步实现了一个“黑名单登记”作用。序CRISPR/Cas9系统将鉴别出入侵者的“姓名”（PAM）并寻找它的“身份证”（原间距编码序列），随后把入侵者身份信息做为“档案资料”（间距编码序列）纪录到“黑名单”（CRISPR编码序列）中。当噬菌体病毒初次侵入寄主细菌，病毒的双链DNA被引入细胞內部。CRISPR/Cas9系统是从这些外源DNA中提取每段编码序列做为外源DNA的“身份证”，随后将其做为新的间距编码序列被融合到基因组的CRISPR编码序列当中。因此，这些与间距编码序列相匹配的“身份证”被称为原间距编码序列（protospacer）。
殊不知，“身份证”的选择并非任意的。原间距编码序列向两边拓宽的好多个碱基都非常保守，被称为原间距编码序列邻近基序（protospacer adjacent motif，PAM）。
PAM一般由NGG3个碱基组成（N为随意碱基）。病毒入侵时，Cas91和Cas92编号的蛋白质将扫描仪这些外源DNA，并鉴别出PAM地区，随后将邻近PAM的DNA编码序列做为备选的原间距编码序列。接着，Cas91/2蛋白质复合物将原间距编码序列从外源DNA中裁切出来，并在别的酶的帮助下将原间距编码序列插进邻近CRISPR编码序列前导区域中下游。随后，DNA会进行修补，将开启的双链豁口合闭。与此同时，每段新的间距编码序列就被加上来到基因组的CRISPR编码序列当中。
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