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T7 RNA聚合酶的特定

  • 作者:admin
  • 发布时间:2020-06-16 12:03
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在黏菌丝体的线粒体中已经观察到插入RNA编辑并对其进行了表征。
单个亚单位线粒体RNA聚合酶通过共转录添加非模板核苷酸,以产生具有完整遗传信息的功能性tRNA,rRNA和mRNA。在与线粒体RNA聚合酶相关的聚合酶中已经观察到非模板核苷酸向RNA的3'端添加。这种活性已经观察到用T7 RNA聚合酶(T7 RNAP),单亚基聚合酶的充分表征的原型,作为非特异性的添加核苷酸到的T7 RNAP转录的3'末端
的体外在这里,我们证明了这种新颖的活性是一种编辑活性,可以在存在时将能够形成具有凹入的3'末端的分子内或分子间发夹环的寡核苷酸添加到T7 RNA聚合酶中,从而向RNA或DNA的3'末端添加特定的核糖核苷酸。至少一种核糖核苷酸三磷酸。通过Watson-Crick碱基配对将特定的核糖核苷酸添加到凹陷的3'末端,该碱基配对的非碱基配对的核苷酸邻近3'末端。通过改变5'-延伸的长度,发夹环和发夹双链体的长度来获得对该活性的优化。这些性质定义了不同于转录延伸或起始的T7 RNAP活性。
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