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行业动态
提高小鼠 大鼠基因工程效率的新方法
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必须要懂的CRISPR/Cas9两项基础应用:
1、非编码基因靶基因敲除
通过在非micro RNA前体的发夹结构5 '侧翼和3 '侧翼分别设计sgRNA,可以删除发夹DNA结构片段,实现micro RIVA的敲除。
如果sgRNA成熟片段含有sgRNA识别序列,可直接实现删除和插入式基因敲除。同样,利用CRISPR/Cas9技术可以实现对incRNA等的基因敲除。
2、编码基因的靶向基因敲入
Cas9能切断靶基因DNA双链产生DSB损伤,诱发细胞重组修复。这种情况下,可以提供同源修复模板供体,如果该供体也导入点突变、维护区域置换和标记代码排列(例如GFP、f、lag、ha…)等,研究人员就可以在基因组的特定位置实现基因打入。